关于酶标仪的详解
发布日期:2022/11/10 9:10:49
什么是酶标仪
酶标仪即酶联检测仪。是酶联吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器??杉虻サ胤治胱远腿远酱罄?,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
酶标仪工作原理
工作原理为一台升级的的分光光度计
酶标仪与分光光度计的不同
1. 通量上:支持6、12、24、48、96、384孔板
2. 功能上:单功能酶标仪(吸收光、化学发光、荧光)多功能酶标仪
酶标仪能做什么
凡是与光信号相关的实验、需要高通量、需要节省试剂的实验且可以转移到微孔板中液体的物质,都可以考虑使用微孔板检测仪(酶标仪)进行信号检测。
酶标仪分类:
1.基于滤光方式不同可分为:滤光片式酶标仪和光栅式酶标仪(上海闪谱就是此类)
2.按功能划分可分为:光吸收酶标仪、化学发光酶标仪、荧光酶标仪和多功能酶标仪。
光吸收检测常见应用
1.DNA/RNA含量测定常用于快速检测质粒DNA浓度
2.ELISA(酶联吸附试验)检测方法多(间接 法、竞争法、双抗夹心法等)
3.细胞活力检测MTT\XTT等酶活动力学检测
光吸收法优缺点:
1.优点:灵敏、特异性、简单、快速、对环境没污染、稳定易于自动化操作等。
2.不足:降低灵敏度(针对新方法其易受到杂质干扰)、动态范围比较窄(3数量级),步骤繁琐(清洗步骤多)
化学发光检测
发光是指物体吸收外加能量激发,发出可见光
化学发光检测又被称为自发光检测,这类检测与其他检测的区别在于,整个测试过程中需要提供外界光源。那么检测器所捕捉到的光是来自于化合物的发光反应(将化学能转化为光能)
荧光检测
荧光检测特点:应用领域广、可多标记检测、灵敏度高
荧光检测常见应用:
1.生物大分子(DNA/RNA或蛋白质)
2.荧光(荧光标记物,如GFP\YFP\CFP等)
3.细胞学分析(细胞增殖、细胞毒理、细胞迁移、细胞吸附、细胞渗透)
4.线粒体膜电位分析
5.钙流检测
操作注意事项
酶标仪的功能是用来读取酶联试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:
1.使用加液器加液,加液头不能混用。
2.洗板要洗干净。如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。
3.严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
4.在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
5.请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。
6.如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。
7.如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。
8.不要在测量过程中关闭电源。
9.对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。
10.使用后盖好防尘罩。
11.出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。
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